چکیده: آلفالینولنیک اسید به عنوان یک اسید چرب اشباع نشده مهم متعلق به خانواده امگا3 است که در انسان تولید نمی شود و از این رو باید به عنوان بخشی از رژیم غذایی برای حفظ سلامت انسان در نظر گرفته شود. منبع اصلی تامین این گروه از اسیدهای چرب ماهی ها می باشند که به دلیل وجود آلودگی های موجود در زیست بوم ماهیان٬ تولید گیاهان دانه روغنی با توانایی تولید اسید چرب امگا3 بالا می تواند منبع ارزان و ارزشمندی را در اختیار قرار دهد. هدف از این مطالعه همسانه سازی ژن دلتا15 دسچوراز (Δ15desaturase) جهت انتقال به گیاهان روغنی به منظور افزایش محتوای آلفالینولنیک اسید به عنوان پیش ساز اسیدهای چرب غیر اشباع بلند زنجیر می باشد. بدین منظور جهت خالص سازی و تکثیر ژن دلتا15دسچوراز ابتدا RNA کل از سلول های مخمر پیکیاپاستوریس استخراج و cDNA سنتز شد. ژن دلتا15دسچوراز توسط انجام واکنش زنجیره‌ای پلیمراز با آغازگرهای اختصاصی تکثیر و در ناقل pTZ57R/T در باکتری اشرشیا کولی کلون شد. پس از انتخاب کلونی‌های رشد یافته بر روی محیط انتخابی حاوی آنتی‌بیوتیک آمپی سیلین و انجام کلونی PCR کلون‌های مثبت انتخاب شدند. هضم توسط آنزیم‌های برشی XbaIوSacI و توالی یابی قطعه کلون شده٬ وجود ژن در ناقل همسانه سازی تایید کرد. سپس این سازه ژنی در ناقل نوترکیب pKS حاوی پروموتر ناپین ویژه بذر کلون گردید. برش آنزیمی با آنزیم های HindIII و SacIانجام و قطعه‌ی ژن مورد نظر از ناقل جدا و درون ناقل pBI121 قرار گرفت و سپس در باکتری اشرشیا کولی کلون گردید. کلون‌های رشد یافته در محیط انتخابی حاوی آنتی بیوتیک کانامایسین گزینش و یکپارچگی سازه حاوی ژن دلتا15دسچوراز و پروموتر ناپین توسط انجام کلونی PCR تایید شد. پلاسمید نوترکیب حاصل به اگروباکتریوم انتقال داده شد. پس از هم کشتی با اگروباکتریوم جهت تراریزش گیاه توتون، رشد ریزنمونه‌های گیاه توتون در محیط انتخابی حاوی غلظت‌های مختلف کانامایسین و سفوتاکسیم تراریختی انها را تایید نمود. واکنش PCR تراریخت بودن گیاهان توتون را هم در سطح DNA تایید نمود.